Medición de calcio
en suero y orina 1

Este método reduce o elimina la posible interferencia del sodio, el potasio y los fosfatos normalmente presentes en el suero y la orina al diluir las muestras con un diluyente que contiene ácido etilendiaminotetraacético (EDTA). 

 

No hubo efecto de la presencia de proteínas disueltas en la señal de calcio; la proteína permanece en solución cuando el suero se diluye con EDTA ≤0,15 M. Las muestras diluidas preparadas contenían 0,1-0,3 mEq/l
de calcio en orina y 1-3mM/l en suero, con una precisión de ± 0,1mEq/l 

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reactivos
Solución madre de EDTA: se prepara una solución 0,2 M de la sal de amonio de EDTA a pH 8,0 colocando 58,4 g de EDTA en un vaso de precipitados de 400 ml y agregando 100 ml de agua destilada desionizada.  agregado para disolver el polvo y elevar el pH a 8. 

 

La solución se filtra en un matraz aforado de 1 litro y se diluye a volumen con agua destilada desionizada. 

 

Se prepararon soluciones madre estándar, siendo estas, cloruro de sodio y cloruro de potasio 1,0 M y cloruro de calcio y cloruro de magnesio 0,2 M a partir de NaCl, KCl, CaCO3 y MgCl cuidadosamente secados.

 

A standard 1.0 M phosphate solution was prepared from NaH2PO4∙H2O. 

 

Soluciones de corrección de fondo
Se prepararon diferentes soluciones de corrección de fondo para diluciones de suero y orina a partir de soluciones madre que contenían todos los cationes anteriores excepto calcio (es decir, sodio, potasio, magnesio y fosfato), en las concentraciones que se muestran.

 

Procedimiento

Las soluciones, los estándares y las muestras se diluyeron 50 veces antes de la aspiración en la llama.  El suero o la orina se diluyeron 50 veces usando EDTA 0,15 M, preparado a partir de la solución madre de EDTA.

 

Para llevar a cabo una dilución de 50 veces, se agregan 2 ml de suero u orina a un matraz volumétrico de 100 ml (no se debe usar vidrio si se va a medir Na) y se enrasa.

 

La solución de corrección de fondo se utiliza para poner a cero el instrumento, ya que contiene todas las especies emisoras de luz que se espera que estén presentes en la muestra (excepto la que se va a medir). La puesta a cero del instrumento requiere ejecutar la solución de corrección de fondo como un blanco antes de la calibración del fotómetro de llama.

 

A continuación, se calibró el fotómetro de llama utilizando una solución de cloruro de calcio 0,2 M antes del análisis de las muestras.

 

Preparación de gráfico estándar

Configure el fotómetro de llama de acuerdo con la Calibración multipunto/de un solo ion que se encuentra en la página 24 del Manual de instalación y operación de BWB Technologies, para medir la emisión de potasio. Nebulice las soluciones estándar de trabajo de litio y ajuste los controles hasta que se obtengan lecturas constantes de cero y máximas. Nebulice las soluciones estándar de trabajo intermedias y construya un gráfico que relacione los datos de emisión sin procesar (conocidos como RAW en  BWB el fotómetro de llama) con la concentración de todas las soluciones estándar.